Repository of the Academy's Library

Új feszültségfüggő és 2P típusú kálium csatornák klónozása és szerepük vizsgálata = Cloning and functional characterisation of new voltage-dependent and 2P-type

Enyedi, Péter and Czirják, Gábor and Molnár, Zoltán (2008) Új feszültségfüggő és 2P típusú kálium csatornák klónozása és szerepük vizsgálata = Cloning and functional characterisation of new voltage-dependent and 2P-type. Project Report. OTKA.

[img]
Preview
PDF
46954_ZJ1.pdf

Download (304Kb)

Abstract

Pályázatunkban feszültségfüggő- és 2P-típusú kálium csatornák klózását, valamint működésük vizsgálatát tűztük ki célul. Elsősorban szabályozásukkal valamint fizológiás szerepükkel foglalkoztunk. A 2P típusú TRESK csatornát másodikként klónoztuk meg, és elsőként írtuk le kalcium-függő szabályozását. Kimutattuk, hogy a TRESK-et ?a 2P háttér csatornák között egyedülálló módon- az intracelluláris kalcium koncentráció emelkedése aktiválja. E hatást egy foszfatáz, a kalcineurin közvetíti. A kalcineurin reverzibilisen defoszforilálja a TRESK csatorna intracelluláris hurok szakaszának 276-os foszfoszerinjét, aminek következtében a csatorna konduktanciája közel 10x-esére fokozódik. Felismertük, hogy a TRESK intracelluláris hurok részén egy olyan szekvencia motívum (PQIVID) van jelen, melyhez hasonló a kalcineurin legismertebb szubsztrátjában, az NFAT-ban is megtalálható. Kimutattuk, hogy a kalciummal aktivált kalcineurin e motívumon keresztül is kapcsolódik a TRESK-hez, ami előfeltétele a csatorna defoszforilációjának/aktiválásának. Vizsgálatainkban részletesen elemeztük a TRESK farmakológiai tulajdonságait, eredményeink alapján a TRESK áram egyrészt elkülönítő más 2P csatornákétól, másrészt megállapítható aktivációjának mértéke is. A Kv8.2 feszültségfüggő kálium csatorna klónozását követően kimutattuk, hogy az alegység elsősorban a retina fotoreceptoraiban expresszálódik, és jelenléte e sejtek számára különleges elektrofiziológiai tulajdonságot biztosít. | The aim of our OTKA project was to clone and characterize 2P-type and voltage dependent potassium channels. We have focused mainly on their regulation and physiological role. We published the second paper about the cloning of the 2P type TRESK channel and we described its calcium dependent regulation. We have shown that TRESK, unlike any other 2P-type potassium channel, is activated by elevation of the cytoplasmic Ca2+ concentration. This effect is mediated by the calcium dependent phosphatase, calcineurin. Calcineurin dephosphorylates phosphoserine 276 in the intracellular loop of TRESK what results in its increased conductance of almost 10-fold. We recognized an amino acid stretch in the intracellular loop of TRESK (PQIVID) which is similar to a motif possessed by the most important substrate of calcineurin, NFAT. We have shown that calcineurin, when activated by Ca2+, attaches to TRESK through this motif and this binding is necessary for the dephosphorylation/activation of the channel. We also analyzed the pharmacological properties of TRESK; based on these results TRESK current can be distinguished from that of other 2P potassium channels. In addition, the degree of the activation of TRESK can also be estimated. After we had cloned the Kv8.2 voltage sensitive potassium channel we showed that the subunit is expressed predominantly in the photoreceptors of the retina and its current significantly contributes to the unique electrophysiological properties of these cells.

Item Type: Monograph (Project Report)
Uncontrolled Keywords: Elméleti Orvostudomány
Subjects: R Medicine / orvostudomány > R1 Medicine (General) / orvostudomány általában
Depositing User: Mr. Andras Holl
Date Deposited: 08 May 2009 11:00
Last Modified: 30 Nov 2010 16:57
URI: http://real.mtak.hu/id/eprint/1643

Actions (login required)

View Item View Item