REAL

Hisztamin hatása a sejtdifferenciációra, összehasonlító vizsgálatok tumor - és embrionális őssejteken = Effect of histamine on cell differentiation, comparative study of tumor-and embronic stem cells

Tóth, Sára and Falus, András and Hegyesi, Hargita and Hegyi, Krisztina (2010) Hisztamin hatása a sejtdifferenciációra, összehasonlító vizsgálatok tumor - és embrionális őssejteken = Effect of histamine on cell differentiation, comparative study of tumor-and embronic stem cells. Project Report. OTKA.

[img]
Preview
PDF
62558_ZJ1.pdf

Download (389Kb)

Abstract

Célkitűzésünk a genetikailag hisztamin hiányos és WT dermatofibrosarcoma tumorsejtek és embrionális őssejtek differenciációs markereinek összehasonlítása volt. Az indukált tumorokból alapított sejttenyészetekből tumor spheroid formájában fenntartható klónokat hoztunk létre, melyek jellemzőikben hasonlítottak az embrionális testet (EB) képző őssejtekre. A továbbiakban microarray analízissel a letapadó, illetve spheroidként/EB-ként növő sejtek génexpressziós mintázatát vizsgáltuk, különös tekintettel az egyedfejlődésben szerepet játszó, és a sejt önmegújulásért felelős transzkripciós faktorokra. Mivel az array adatok igen nagyszámú gén aktivitásában mutattak különbséget, ezért az Ingenuity pathway analízis nyomán csak a Wnt jelátviteli útra koncentráltunk a továbbiakban. Az így kiemelt Id2, Sox2, Nestin, Col2A1 génhálózat expressziós tendenciáit real-time PCR-rel és Western blottal próbáltuk validálni, azonban a 3 módszerrel detektált változások tendenciái nem vagy csak részben mutattak egyezést. Mivel a spheroid- és EB-képzésben a sejt-mátrix kapcsolatoknak is szerepe van (erre utalhat a Col2A1) ezért ebbe az irányba terjesztettük ki kutatásainkat, az adherens és spheroid/EB sejtek adhéziós viselkedését vizsgálva, különös tekintettel egy másik (a hisztaminnal összefüggésben már igazolt szerepű) mátrix komponensre, a fibulin5-re. A HDC KO sejtek fokozottabb adhézióval és fibulin5 expresszióval rendelkeznek, ez összhangban áll a korábban melanoma sejteken tett megfigyelésünkkel. | Our aim was to compare the differentiation markers of BalB/c WT and HDC KO dermatofibrosarcoma tumor cells and embryonic stem cells with the same genetic background. From the induced tumors cell cultures and non-adhesive spheroid forming clones were established, which were similar embryoid bodies (EBs). Subsequently microarray analyses on Agilent platform were carried out to determine the gene expression patterns of the adherent and spheroid or EB forming cells. We focused our interest to those transcription factors involved in cellular self-renewal and in early embryogenesis. As the array data showed differences in hundreds of genes, we concentrated our efforts - after using Ingenuity pathway analysis - the Wnt pathway, important in self-renewal and tumorigenesis. Id2, Sox2, Nestin and Col2A1 elements of this network were used for validation via real-time PCR and Western blotting. Unfortunately the tendencies observed here did not fit well the data derived from microarray analysis. Since cell-matrix connections are important in both spheroid and EB formation (reflected by the Col2A1 expression, too) we expand our efforts to study the adhesive behaviour of adherent and spheroid/body forming cells in connection with an other matrix component fibulin5, its role related to histamine has been proven earlier by us. The HDC KO cells had better adhesion characteristics and increased FBLN5 expression, which is in good correlation our earlier observations made on melanoma cells.

Item Type: Monograph (Project Report)
Uncontrolled Keywords: Onkológia
Subjects: R Medicine / orvostudomány > RC Internal medicine / belgyógyászat > RC0254 Neoplasms. Tumors. Oncology (including Cancer) / daganatok, tumorok, onkológia
Depositing User: Mr. Andras Holl
Date Deposited: 07 Sep 2010 14:30
Last Modified: 30 Nov 2010 11:25
URI: http://real.mtak.hu/id/eprint/2625

Actions (login required)

View Item View Item