T sejt rekonstitúciós vizsgálatok ZAP-70 deficiens egerekben

Olasz, Katalin and Berki, Timea and Prenek, Lilla and Németh, Péter and Boldizsár, Ferenc (2013) T sejt rekonstitúciós vizsgálatok ZAP-70 deficiens egerekben. In: 43. Membrán-Transzport Konferencia, 2013.05.21-24., Sümeg.

Preview

Text T_sejt_rekonstitucios_vizsgalatok_ZAP-70_deficiens_egerekben.pdf Download (221kB) | Preview

Abstract

A ZAP-70 kináz (70kDa-os zéta lánc aszociált kináz) központi szerepet tölt be a T sejtek antigén receptoron keresztüli aktivációjának jeltovábbításában. A molekula fontosságát jól jelzi, hogy hiányában számos jelátviteli folyamat gátolt, illetve egérben és emberben is súlyos T sejtes immundeficiencia alakul ki. Ez utóbbi oka, hogy a ZAP-70 kináz a T sejt differenciáció során is kritikus szerepet tölt be, hiányában a T sejtek fejlődése blokkolódik a thymusban a kettős pozitív (CD4+CD8+) stádiumban, aminek következtében a perifériás nyirokszervekben nem találhatunk érett T sejteket. Munkánk során ZAP-70 deficiens egerekben tanulmányoztuk a T sejt hiány helyreállítás lehetőségeit. Ehhez adoptív transzfer vizsgálatokat hajtottunk végre, melyek során a ZAP-70-/- egereket vad típusú (azaz ZAP-70-et expresszáló) tetvéreik csontvelő illetve thymus sejtjeivel rekonstituáltuk intrahepatikus ill. intraperitonealis utakon. Eredményeink szerint mindkét transzfer technika hatékonynak bizonyult a T sejtek helyreállítátban. A sejtek transzferét követően 2 hetenként vérvétellel igazoltuk a T sejtek megjelenését a vérben. Azon állatok túlélése, melyekben T sejtek jelentek meg szignifikánsan meghaladta, az immundeficiens egerekét. A kísérletek végén (a transzfert követő végzett áramlási citometriás vizsgálatok illetve immunhisztokémia is azt igazolta, hogy T sejtek jelentek meg a transzferált egerek lépében, nyirokcsomóiban illetve a bélhez aszociált nyirokszövetekben. Továbbá a thymus sejt összetételének vizsgálata során megállapítottuk, hogy szignifikánsan emelkedett az érett CD4- vagy CD8 egyszeresen pozitív sejtek aránya, amely a T sejt érés normalizálódását jelezte. Sikerült kétféle transzfer módszerrel stabil kimérizmust létrehoznunk ZAP-70 hiányos egerekben. Bizonyítottuk, hogy mind a thymus mind a csontvelői eredetű sejtek képesek voltak a T sejt fejlődés helyreállítására.

Actions (login required)

Edit Item