A Rho GTPazok foszforilációjának szerepe a kórokozókkal szembeni védekezésben és a növényi egyedfejlődésben = The role and significance of Rho GTPase phosphorylation during pathogenesis and normal plant growth

Fehér, Attila and Dulguun, Dorjgotov and Fodor, Csilla and Manuela, Jurca and Ötvös, Krisztina (2009) A Rho GTPazok foszforilációjának szerepe a kórokozókkal szembeni védekezésben és a növényi egyedfejlődésben = The role and significance of Rho GTPase phosphorylation during pathogenesis and normal plant growth. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 64230_ZJ1.pdf Download (261kB) | Preview

Abstract

A Rop GTPázok a sejten belüli jelátviteli hálózatok molekuláris kapcsolói. Alapvető szerepük van számos sejtfolyamat szabályozásában, de a kapcsolódó jelátviteli mechanizmusok növényekben még alig ismertek. Kutatásaink során azonosítottunk lucernában olyan kináz fehérjéket (RRK), amelyeket a Rop GTPázok specifikusan aktiválnak. Pályázatunk ezek jellemzéséhez kapcsolódott. Kimutattuk, hogy a kináz nem foszforilálja a Rop GTPázt. Ennek ellenére megvizsgáltuk a Rop GTPáz potenciális foszforilációjának az esetleges szerepét a GTP-kötésre, GTPáz aktivitásra és fehérje-fehérje kölcsönhatásokra. Úgy találtuk, hogy az adott mutáció befolyásolja a fenti jellemzőket. Az RRK kinázokat indukálható promóterrel kifejező, illetve a kináz fehérjéket nem termelő transzgenikus növényeket állítottunk elő, melyek vizsgálata azonban még nem fejeződött be. A német partnertől segítséget kaptunk fehérjék tömegspektroszkópia vizsgálatában, a bimolekuláris fluoreszcencia komplementáció technika honosításában, a GTP-kötés fluoreszcencia energia transzferen alapuló vizsgálatában illetve kutatási anyagok cseréjén keresztül. Az együttműködés hozadéka egy közösen beadott európai pályázat, amelynek a második változata még elbírálás alatt áll. | Rop GTPases are molecular switches involved in many basic cellular processes in plants. Despite their central role in cellular signaling, our knowledge on their signaling partners is scarce. We identified for the first time plant kinases (RLCK VI_A) directly activated upon binding to Rop GTPases. Our research activity was linked to the characterization of this signaling interaction. It was investigated whether the kinases can phosphorylate the Rop GTPase. Although it could not be established, the potential phosphorylation of the GTPases on a specific residue was further investigated using a phosphomimic GTPase mutant. This mutation had a negative effect on GTP-binding and hydrolysis, and differentially affected protein-protein interactions. Furthermore, transgenic plants have been created that overexpress some of the RLCK VI_A kinases under the control of an inducible promoter, or, alternatively, do not expressthe kinase proteins as a result of RNA-interference. However, the characterization of these plants could not be accomplished yet. Collaboration with the German partner was successful. In addition to the exchange of research material, we had access to and learned technologies like MALDI-TOF analysis of protein phosphorylation, bimolecular fluorescence complementation, GTP-binding assay based on fluorescent energy transfer. The collaboration resulted in a common application for a European training grant, the second version of which is currently under evaluation.

Actions (login required)

Edit Item