Proteaszóma szubsztrátok felismerési mechanizmusának genetikai analízise = Genetic analysis of the protein delivery mechanism for proteasomal degradation

Deák, Péter and Pál, Margit and Udvardy, Andor (2012) Proteaszóma szubsztrátok felismerési mechanizmusának genetikai analízise = Genetic analysis of the protein delivery mechanism for proteasomal degradation. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 68784_ZJ1.pdf Download (598kB) | Preview

Abstract

P elemre épülő klasszikus és molekuláris genetikai technikákkal mutációkat izoláltunk, és/vagy transzgenikus RNS-interferencia vonalakat állítottunk elő az ecetmuslica ubikvitin-proteaszóma rendszerét (UPR) kódoló génekben. A mutánsok részletes genetikai, biokémiai és molekuláris analíziséből új ismereteket szereztünk az UPR egyes komponenseinek szerepéről a sejtciklus szabályozásában. Azonosítottuk és jellemeztük a Drosophila anafázis-promoting komplex (APC) katalitikus moduljának összetételét és szerepét. Azonosítottuk egy új ubikvitin konjugáló enzim, az Ube2S Drosophila ortológját, és kimutattuk, hogy stressz-indukált ubikvitinációban van szerepe. Kimutattuk, hogy a p54, Dsk2 és Rad23 poliubikvitin-kötő receptorok funkcionális interakciót mutatnak egymás között. Átfogó bioinformatikai analízissel azonosítottunk 40 dezubikvitináló enzimet kódoló gént Drosophilában, majd meghatároztuk mutánsaik egyedfejlődési és citológiai fenotípusait. Kimutattuk, hogy a DmUsb5 dezubikvitináló enzimnek szerepe van az ubikvitin homeosztázis fenntartásában és az apoptózis szabályozásában. Végezetül demonstráltuk, hogy az APC ciklikus aktivitást mutat endomitózis során is, ahol a ciklinek ubikvitin-függő degradációjával lehetővé teszi a replikációs komplex ismételt összeszerelődését. | P element induced mutants and transgenic RNA-interference lines affecting genes of the ubiquitin-proteasome system (UPS) were established and characterized. Valuable new information about their function in cell cycle regulation was gained following detailed genetic, biochemical and molecular analyses of these mutants. Through genetic and physical interaction studies, we identified and characterized components of the catalytic module of the anaphase promoting complex (APC). The Drosophila orthologue of a new ubiquitin conjugating enzyme, DmUbe2S was identified and demonstrated, that it functions in stress related ubiquitylation. We have shown that the p54, Dsk2 and Rad23 polyubiquitin binding receptors functionally interact with each other. Through comprehensive bioinformatic analyses, forty Drosophila genes coding for deubiquitylating enzymes were identified and characterized preliminarily. It was established that the DmUsb5 deubiquitylating enzyme has a role in maintaining intracellular ubiquitin homeostasis and in regulating apoptosis. Finally, we have demonstrated that the APC shows cyclical activity during endomitózis, in which it promotes cell cycle progression by lowering cyclin concentration in order to facilitate the relicensing of replication origins.

Actions (login required)

Edit Item