ABC transzporterek vizsgálata emberi őssejtekben és a sejt-differenciálódás során = Expression and function of ABC transporters in human stem cells and during cell differentiation

Sarkadi, Balázs and Apáti, Ágota and Cserepes, Judit and Homolya, László and Laczka, Csilla and Orbán, Tamás I. and Pászty, Katalin and Szabó, Katalin and Szakács, Gergely and Szebényi, Kornélia and Telbisz, Ágnes (2011) ABC transzporterek vizsgálata emberi őssejtekben és a sejt-differenciálódás során = Expression and function of ABC transporters in human stem cells and during cell differentiation. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 72057_ZJ1.pdf Download (127kB) | Preview

Abstract

A projektben az ABC (ATP-Binding Cassette) transzporterek kifejeződését és funkcióját vizsgáltuk emberi őssejtekben, valamint követtük a normális és daganatos sejtdifferenciálódás során bekövetkező molekuláris szintű változásokat. Elsősorban a gyógyszerek hatásában, anyagcseréjében, az ellenük kifejeződő rezisztenciában szereplő transzportereket, valamint a sejtmembrán lipid-anyagcseréjében szerepet játszó ABC transzportereket vizsgáltuk. A projekt fontos része volt az emberi embrionális őssejtek speciális tenyésztési és differenciálási módszereinek adaptálása, továbbfejlesztése. Az ABC transzporterek vizsgálata során igazoltuk, hogy a humán embrionális őssejtekben az ABCG2 a legjelentősebb xenobiotikum transzporter, a korai sejtdifferenciálódás során az ABCG2 kifejeződése először emelkedik, majd jelentősen csökken. Megállapítottuk, hogy az ABCG2 mRNS használata különbözik a tumorsejtekben, a differenciálódott szöveti sejtekben, illetve a nem-differenciálódott őssejtekben. Új, transzpozon-alapú módszereket dolgoztunk ki az őssejtek stabil genetikai módosítására, fluoreszcens riporter fehérjék bevitelére. Az ABCG2 és az ABCA1 fehérjék címkézett változatainak kifejezése lehetővé tette a transzporterek sejten belüli lokalizációjának követését. Részletesen elemeztük az ABCG2 multidrog transzporter szerkezet-funkció összefüggéseit, szubsztrátokkal jelentkező kölcsönhatásait, alkalmazásokat fejlesztettünk ki a gyógyszerhatások vizsgálatára. | In this project we have studied the expression and function of ABC (ATP-Binding Cassette) transporters in human embryonic and tumor stem cells and followed the changes during normal and tumor cell differentiation at a molecular level. We have focused on the investigation of ABC transporters involved in drug metabolism, cancer multidrug resistance and cellular lipid metabolism. An important part of the project was to establish and further develop proper laboratory conditions and methodologies for culturing and differentiating human pluripotent stem cells. When studying human ABC transporters in human embryonic stem cells we demonstrated the major role of the ABCG2 protein. We found that the expression of this transporter first increases, then greatly decreases during early stem cell differentiation. The use of mRNA was found to be different in the tumor cells, differentiated cells, and pluripotent stem cells, respectively. We have developed new, transposon-based methods for the stable genetic modification of pluripotent stem cells and for the expression of fluorescent reporter proteins. By using tagged versions of the ABCG2 and ABCA1 proteins we could follow the intracellular localization of these transporters. We have studied in detail the structure-function relationships and substrate interactions of the ABCG2 transporter and developed new assays for studying drug interactions.

Actions (login required)

Edit Item