A humán ABCG2 multidrog transzporter működésének vizsgálata = Investigation of the mechanism of action of the human ABCG2 multidrug transporter

Laczka, Csilla (2009) A humán ABCG2 multidrog transzporter működésének vizsgálata = Investigation of the mechanism of action of the human ABCG2 multidrug transporter. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 45957_ZJ1.pdf Download (524kB)

Abstract

A humán ABCG2 egy plazma membrán glikoprotein, amely a szervezet méregtelenítésében játszik szerepet, ezen kívül ellenállóvá teheti a rákos sejteket bizonyos gyógyszerekkel szemben. Az ABCG2 az őssejtek egyik jellegzetes fehérjéje. Jelen kutatás során a következő főbb eredményeket értük el: 1. Változatos szubsztrát specificitással és transzport aktivitással bíró mutáns változatokat hoztunk létre a vad-típustól mindössze a 482-es aminosav pozícióban eltérő ABCG2 mutánsok előállításával, amelyek hasznosíthatók lehetnek például terápiás sejtek védelmében. 2. Igazoltuk, hogy az ABCG2-Q141K polimorfizmus csökkent aktivitással bír, ezért az ezt a változatot hordozó egyedek bizonyos gyógyszerekkel szemben érzékenyebbek lehetnek. 3. Kimutattuk, hogy az ABCG2 kölcsönhatásba lép egyes, a klinikumban használt tirozin kináz gátló gyógyszerekkel, tehát befolyásolhatja ezek hatékonyságát a kemoterápia során. 4. Elvégeztük egy ABCG2-specifikus antitest jellemzését, amely hasznosítható lehet tumoros mintákban lévő ABCG2 kimutatására, vagy akár őssejtek kiválogatására. 5. Kimutattuk, hogy a membrán koleszterin tartalma befolyásolja az ABCG2 transzporter aktivitását, tehát a fehérje működése különböző membrán kompartmentekbe történő lokalizációja illetve internalizációja által szabályozódhat. 6. Fluoreszcens ?címkével? ellátott ABCG2 fehérjét hoztunk létre, amellyel pl. ABCG2 szubsztrátok tesztelhetők élő sejtekben vagy lokalizációs vizsgálatok végezhetők. | Human ABCG2 is a plasma membrane glycoprotein that protects our body against toxic compounds. ABCG2 is also able to confer resistance against several drugs used in cancer chemotherapy. ABCG2 is a marker protein of stem cells. The main findings of our research are the following: 1) We have generated ABCG2 mutants having altered substrate specificity and transport activity by inducing single amino acid change at position 482. These mutants are ideal candidates to be used for protection of modified cells in medical gene therapy. 2) We have shown that the Q141K polymorphism of ABCG2 has decreased activity, therefore may result in altered pharmacokinetics of ABCG2 substrates and increase chemosensitivity in clinical oncology. 3) We have demonstrated that ABCG2 interacts with several clinically relevant tyrosine kinase inhibitors; therefore this protein may influence their effectiveness. 4) We have characterised an ABCG2-specific antibody that can be an important tool in detection of ABCG2 in clinical samples or in stem cell research. 5) We have shown that membrane cholesterol level influences the activity of ABCG2, therefore the localisation of ABCG2 e.g. in cholesterol rich rafts may have major impact on the activity of this transporter. 6) We have generated a cell line expressing functionally active, green fluorescence protein tagged ABCG2 that may be a useful tool for e.g. localisation studies or drug-screening in living cells.

Actions (login required)

Edit Item