Astaxanthin bioszintézis genetikai befolyásolása Phaffia rhodozyma-ban = Genetic influence on biosynthesis of astaxanthin in Phaffia rhodozyma

Vágvölgyi, Csaba and Kasza, Zsolt and Nyilasi, Ildikó (2007) Astaxanthin bioszintézis genetikai befolyásolása Phaffia rhodozyma-ban = Genetic influence on biosynthesis of astaxanthin in Phaffia rhodozyma. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 37471_ZJ1.pdf Download (80kB)

Abstract

Az astaxanthin (3,3¢-dihydroxy-b,b-carotene-4,4¢-dione) termelő élesztők nagy biotechnológiai jelentőségűek. RAPD analízisen alapuló csoport analízist végrehajtva igazoltuk , hogy az astaxanthin-termelő izolátumok két fajba (Xanthopyllomyces dendrorhous és Phaffia rhodozyma) tartoznak. Különböző mutációs eljárásokat - gamma-, UV-sugárzás és kémiai mutagenezis, illetve ezek kombinációi - alkalmazva auxotróf és színmutánsokat izoláltunk mindkét élesztőfajból. Pigment- illetve astaxanthin túltermelő mutánsokat, melyek színanyag profilja jelentősen eltért hoztunk létre. Protoplaszt fúziós kísérleteket végeztünk és fúziós hibrideket izoláltunk és jellemeztünk. In vivo EPR vizsgálatokkal jellemeztük a különböző pigment-profilú mutánsok plazmamembránjának szerkezeti és dinamikus sajátosságait a hőmérséklettel összefüggésben. Meghatároztuk a X. dendrorhous 3-hydroxy-3-methylglutharyl coenzyme A reductase (HMG-CoA reductase) génjének részleges génszekvenciáját. Felfedeztük, hogy mind a P. rhodozyma és a X. dendrorhous képes lebontani az ochratoxin A-t ochratoxin alfává, feltehetően egy sejthez kötött karboxipeptidáz A aktivitás révén. | Astaxanthin (3,3¢-dihydroxy-b,b-carotene-4,4¢-dione) - accumulating yeasts are of great biotechnological interest. RAPD analysis involving astaxanthin-producing yeast strains was performed: cluster analysis based on RAPD markers differentiated isolates of Xanthopyllomyces dendrorhous and Phaffia rhodozyma (asexual) at an intraspecific level. Different mutation strategies, which involves *- and UV-irradiations, as well as chemical mutagenesis of cells was worked out to obtain auxotrophic and colour mutants from these astaxanthin-producing yeasts. Overproducer mutants exhibited different patterns of carotenoid production have also been isolated. Protoplast fusion experiment have been carried out and fusion hybrides have been isolated and characterized. Spin labelling methods were used to describe the structure and dynamic properties of various carotenoids containing X. dendrorhous’s plasma membranes in relation to temperature. A partial gene sequence of 3-hydroxy-3-methylglutharyl coenzyme A reductase (HMG-CoA reductase) of X. dendrorhous has been determined. Ochratoxin degrading activities of P. rhodozyma and X. dendrorhous isolates were discovered. P. rhodozyma is able to convert ochratoxin A to ochratoxin a (possibly mediated by a cell-bound carboxypeptidase A).

Actions (login required)

Edit Item