Fitokróm-A irányította jelátviteli hálózatok Arabidopsis thaliana-ban = Phytochrome A controlled signalling networks in Arabidopsis thaliana

Nagy, Ferenc and Ádám, Éva and Fejes, Erzsébet and Gyula, Péter and Medzihradszky, Mátyás (2009) Fitokróm-A irányította jelátviteli hálózatok Arabidopsis thaliana-ban = Phytochrome A controlled signalling networks in Arabidopsis thaliana. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 60106_ZJ1.pdf Download (327kB)

Abstract

Megállapítottuk, hogy rövid PHYA N-terminális fragmentumok képesek az FHY1/FHL fehérjékkel konformációfüggő módon kölcsönhatásba lépni és fényindukált módon a sejtmagba transzportálódni. Kimutattuk, hogy ezek a PHYA N-terminális fragmentumok azonban nem képesek funkcionális fotoreceptorként működni, és hogy a PHYA fényindukált proteolízisét és sejtmagba irányuló transzportját a fehérje különböző doménjei közvetítik. Nevezetesen az első 406 aminosav alkotta fragmentum elégséges a PHYA fotoreceptor fényindukált sejtmagi transzportjához, míg a 406-686 aminosavakat tartalmazó PHYA fragmentum szükséges a fotoreceptor fényindukált proteolíziséhez. A PHYA fotoreceptort tartalmazó sejtmagi komplexek jellemzésére olyan mutánsokat izoláltunk, amelyekben a PHYA komplexek kialakulása markánsan eltér a vad típusban leírttól. Genetikai térképezéssel és szekvenálással bizonyítottuk, hogy a mutánsok egy csoportjában a mutációk nem a PHYA génben lokalizáltak. E mutánsokban a fúziós PHYA fehérje ugyan degradálódik fény hatására, de a mutánsok hiposzenzitívek távoli vörös fényben, és nem mutathatók ki PHYA-tartalmú sejtmagi komplexek. Mostanra befejeztük hat mutáns részletes genetikai térképezést és az egyes mutációkat pozícióját kb. 150-200 kb-nyi pontossággal behatároltuk. A genetikai térképezés alapján biztosak vagyunk abban, hogy ezek a mutációk olyan géneket érintenek, amelyek eddig nem voltak összefüggésbe hozhatók a PHYA-tartalmú sejtmagi komplexek kialakulásával és működésével. | We provided evidence that, although they cannot function as active photoreceptors, short N-terminal fragments of the photoreceptor PHYA interact in a conformation-dependent fashion with the transport proteins FHY1-FHL and translocate into the nucleus in a light-induced manner. In addition we documented that light-induced nuclear import and rapid degradation of these PHYA N-terminal fragments can be separated and mediated by different domains of the molecule. The short, far N-terminal 406 fragment is sufficient for light-induced nuclear import, whereas the domain between 406-686 is required for light-induced rapid degradation of the PHYA protein. We performed a novel genetic screen to isolate mutants displaying aberrant formation of nuclear bodies containing the photoreceptor PHYA. We provided evidence by genetic mapping and DNA sequencing that in a group of mutants the mutations do not localise in the PHYA gene. In these mutants light induces rapid degradation of the PHYA/YFP fusion protein, yet the mutants are hyposensitive to far-red light and we were unable to detect formation of PHYA/YFP containing nuclear bodies. We have completed detailed genetic mapping of these lines and positioned the mutations to 150-200 kb genomic fragments. Based on their map positions we conclude that these mutations will define novel components required for the formation or stabilization of PHYA-containing nuclear bodies.

Actions (login required)

Edit Item