A ZAP-70 kináz részleges hiányának vizsgálata rheumatoid arthritis egér modellben

Kugyelka, Réka and Olasz, Katalin and Kohl, Zoltán and Sohn, Hee Seung and Tarjányi, Oktávia and Németh, Péter and Berki, Timea and Boldizsár, Ferenc (2015) A ZAP-70 kináz részleges hiányának vizsgálata rheumatoid arthritis egér modellben. In: 45. Membrán-Transzport Konferencia, 2015.05.19-22. , Sümeg.

Preview

Text Sumeg_KR_2015.pdf Download (78kB) | Preview

Abstract

A rekombináns humán G1 (rhG1) domén indukált arthritis (GIA) egér modell sok tekintetben hasonlít a humán rheumatoid arthritishez (RA) főbb klinikai tüneteit és immunológiai paramétereit tekintve. Az autoimmun arthritis BALB/c egerekben humán proteoglikán aggrekán rekombináns G1 doménjével történő immunizálással váltható ki. Ismert, hogy a T-sejtek fontos szerepet töltenek be az arthritis indukciójában; aktivációjuk szabályozásában a T-sejt receptor jelátvitel egyik különösen fontos molekulája a ZAP-70 tirozin kináz is szerepet játszik. Munkánk során azt vizsgáltuk, hogy a ZAP-70 részleges hiánya milyen hatással van az autoimmun arthritis kialakulására a GIA modellben. Vad típusú BALB/c (WT) és ZAP-70 heterozigóta knockout (ZAP-70+/-) egereket párhuzamosan háromhetente immunizáltunk rhG1-el, összesen három alkalommal. A betegség klinikai tüneteit egy 4-es pontrendszer segítségével értékeltük, a gyulladást in vivo lumineszcens képalkotó vizsgálattal jelemeztük, a végtagfunkció mérésére pedig kapaszkodási tesztet végeztünk. A T sejt közvetített immunválasz jellemzésére in vitro lépsejt kultúrákban proliferációs tesztet végeztünk és citokin termelést mértünk. A részleges ZAP-70 hiány érdekes módon nem gátolta a GIA kialakulását, sőt várakozásainkkal ellentétben a pontrendszer és a kapaszkodási idők alapján ZAP-70+/- egerekben WT egerekhez képest kissé súlyosabb arthritis alakult ki. Egyértelmű összefüggést találtunk a pontszám és a funkcionális teszt eredményei között, valamint megfigyeltük, hogy a fizikai teljesítményben jelentkező változások (pl. csökkent kapaszkodási idő) megelőzték az izületi gyulladás megjelenését. A lumineszcens képalkotó vizsgálatok szintén megnövekedett gyulladásos aktivitást mutattak ki a ZAP-70+/- egerek érintett végtagjaiban a WT állatokéhoz képest. A ZAP-70+/- egerek in vitro tesztekben csökkent T sejt proliferációt és IL-4,-6 termelést mutattak, szignifikáns IL-17, IFNγ és TNFα termeléssel. Előzetes várakozásainkkal ellentétben a T-sejt jelátvitelben kiemelkedő fontosságú ZAP-70 molekula részleges hiánya nem csökkentette az autoimmun arthritis súlyosságát GIA egérmodellben. Ebben feltételezhetően a megváltozott T sejt aktiváció, differenciáció és apoptózis játszhat szerepet. Munkánkat az OTKA-K101493. sz pályázata támogatta. Boldizsár Ferenc MTA, Bolyai János Kutatói Ösztöndíjban részesül.

Actions (login required)

Edit Item