REAL

Egy-sejt PCR beállítása sertésen preimplantációs genetikai diagnózis céljából

Fábián, Renáta and Pintér, Tímea and Magyar, Andrea and Bodó, Szilárd (2018) Egy-sejt PCR beállítása sertésen preimplantációs genetikai diagnózis céljából. Animal Welfare, Etológia és Tartástechnológia, 14 (1). pp. 15-21. ISSN 1786-8440

[img]
Preview
Text
AWETH201801015021_doi.pdf

Download (595kB) | Preview

Abstract

Az utóbbi évtizedben az új reprodukciós technikák fejlesztésének és alkalmazásának hatására jelentősen megemelkedett a sertés ágazat termelékenysége. A preimplantációs genetikai diagnózis (PGD) és embriótranszfer segítségével meghatározott ivarú utódokból álló almok állíthatók elő. Az embriókon végzett biopszia révén kinyert sejtek ivarának meghatározása után a kívánt nemű embriók ültethetők recipiens állatokba. Kísérleteinkben egy sertés PGD módszert kívántunk kifejleszteni in vitro létrehozott embriókból embrióbiopsziával kinyert sejteken. Munkánk során az ivarspecifikus PCR-hez pozitív kontrollként a mindkét nemre jellemző sertés mitokondriális 12S rRNS génszekvenciát választottuk, míg az Y kromoszóma kimutatására a sertés hím-specifikus ismétlődő szekvenciát alkalmaztuk a duplex PCR során. Vágóhídról származó petefészkekből kinyert petesejteket használtunk a PCR beállításához, hogy elérjük az embrió ivarának meghatározáshoz szükséges detektálási érzékenységet (6pg/µl DNS). A keletkezett PCR termékek 2%-os agaróz gélen futtatva jól elkülöníthetőek: nőstény esetében egy, hímek esetében két sáv detektálható. A sikeres beállítást követően a PGD módszereként in vitro fertilizációval előállított 8-sejtes embriókat biopsziáztunk és egy-sejt PCR segítségével megállapítottuk a nemüket.

Item Type: Article
Subjects: S Agriculture / mezőgazdaság > SF Animal culture / állattenyésztés
Depositing User: Dr Ferenc Pajor
Date Deposited: 30 Nov 2018 09:32
Last Modified: 30 Nov 2018 09:32
URI: http://real.mtak.hu/id/eprint/88069

Actions (login required)

Edit Item Edit Item