A terápierezisztencia vizsgálata kutyák daganatos, immunológiai és szívelégtelenséggel járó kórképeiben = Examination of multidrug resistance in canine neoplastic immune mediated and cardiac disorders

Vajdovich, Péter and Balogh, Lajos and Tuboly, Tamás and Vörös, Károly (2012) A terápierezisztencia vizsgálata kutyák daganatos, immunológiai és szívelégtelenséggel járó kórképeiben = Examination of multidrug resistance in canine neoplastic immune mediated and cardiac disorders. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 68376_ZJ1.pdf Download (3MB) | Preview

Abstract

Daganatszövetben, azokból és vérből elkülönített sejtekben mutattuk ki az multidrog rezisztencia- (MDR-) fehérjéket immunhisztokémiai (IHC), western blot, ill. a kódoló mRNS-ek mennyiségét, és rt-PCR-es módszerekkel. Az MDR funkciót áramlási (flow) citométeres (FC) és szcintigráfiás (SC) módszerrel is elemeztük. Megállapítottuk, hogy kutyák lymphomájában, a „b” alstádiumú, és T-sejtes immunfenotípusú, nem teljes remissziót mutató, nőstény ivarú esetekben, és a tubulopapillaris ED-kben a Pgp (MDR1) IHC expresszió mértéke szignifikánsan nagyobb a többi esethez képest, ennek mértéke korrelál a rövidebb recidívamentes túléléssel, és a rövidebb élettartammal. Hasonlóan prognosztikus információra jutottunk az in vitro FC (Calcein-teszt), és az in vivo SC (99mTc-MIBI) funkcionális tesztekkel. Az FC vizsgálatok alkalmasok voltak a vérben keringő lymphocytákban a kemoterápia során indukálódó fokozott MDR- transzporter funkció vizsgálatára is. Kutyák nyirokcsomójából izolált „short-term” túlélő sejtek kemoterápiás kezelésének apoptosis vizsgálata alapján megállapítottuk, hogy a doxorubicin a ciklofoszfamiddal, a vinkrisztin a metilprednizolonnal keresztrezisztenciát mutat. Kutyák lymphomájában vizsgáltuk az MDR1, mrp1, mrp2, BCRP membrántranszporterek mRNS-szintjét, azt találtuk, hogy az MDR1, ill. BCRP expressziók mennyiségei prognosztikusnak minősülnek. Szívbeteg, és immun-betegségben szenvedő kutyák lymphocytáinak MDR1, mrp1, mrp2, BCRP mRNS-expresszió szintjeit is vizsgáltuk nem kellő elemszámban. | Multidrug resistance (MDR) proteins were detected by immunohistochemical (IHC), western-blot, techniques and mRNA levels were determined by rt-PCR method in tumour tissues, separated tumour cells, and lymphocytes of peripheral blood. MDR functional tests were performed by flow cytometric (FC) and scyntigraphic (SC) methods. We’ve found that Pgp (MDR1) IHC expression levels were significantly higher in canine lymphoma with “b” substage, T-cell tpye, non complete remission, female and in MGTs in tubulopapillary forms compared to other cases. Higher expression levels were correlating with the shorter relapse free periods (RFP), and overall survival times (OST). Similar prognostic information could be gained by the in vitro FC (Calcein) test, and the in vivo SC (99mTc-MIBI) method. Calcein test was useful for the determination of increased MDR function which is induced in small lymphocytes of peripheral blood during cytostatic treatment. Isolated cells derived from lymph nodes of dogs with lymphoma were examined in “short term” cell cultures treated in vitro by chemotherapy drugs showed similarity in apoptosis between doxorubicin-cyclophosphamide and vincristine-methylprednisolone. Rt-PCR examinations were performed in canine lymphoma for the determination of mRNA expression levels of MDR1, mrp1, mrp2, BCRP. We’ve found that MDR1 and BCRP levels revealed to be prognostic in respect of RFP, and OST. MDR1, mrp1, mrp2, BCRP mRNA levels were determined in dogs with cardiac and immune- disease, the number of cases was not sufficient.

Actions (login required)

Edit Item