A humán metasztázis inhibitor nm23 géncsalád C. elegans ortológjainak genetikai analízise = A genetic characterisation of the human metastasis inhibitor nm23 orthologues in C. elegans

Vellainé Takács, Krisztina (2011) A humán metasztázis inhibitor nm23 géncsalád C. elegans ortológjainak genetikai analízise = A genetic characterisation of the human metastasis inhibitor nm23 orthologues in C. elegans. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 75477_ZJ1.pdf Download (241kB) | Preview

Abstract

Az nm23 géncsalád első csoportjába tartozó gének nukleozid-difoszfát kinázokat (NDPK) kódolnak. Az első csoportba tartozó NDPK-ok C. elegans ortológját, az ndk-1 gént tanulmányoztuk, különös tekintettel a Ras/MAPK jelátvitelben betöltött szerepére. Az ndk-1 inaktiválása a vulva sejtsors meghatározásában olyan defekteket okoz, amelyek a Ras/MAPK útvonal működésével függenek össze. Az ndk-1 mutánsok szomatikus szöveteiben az aktivált MAPK szintje alacsony, ami a Ras/MAPK jelátvitel alulműködésére utal. A C. elegans vulva indukciót, mint kísérleti rendszert alkalmazva, episztázis elemzést végeztünk, és kimutattuk, hogy az NDK-1 a LET-60/RAS-tól downstream, az MPK-1/MAPK-tól pedig upstream hat, a kinase suppressor of Ras (KSR) fehérjék szintjén. A KSR állványfehérjék a Raf/MEK/ERK szignalizációs komponenseket összegyűjtve teszik lehetővé a MAPK jelátvitelt. Kimutattuk, hogy az NDK-1 köt a KSR-2 scaffoldhoz, ezáltal a Ras/MAPK szignál aktivitásának modulálásán keresztül pozitívan hat a differenciációra. Eredményeink in vivo evidenciát szolgáltatnak az NDPK/KSR interakció értelmezéséhez, és hozzájárulhatnak az Nm23 bizonyos szövetekben megfigyelt tumorfejlődést serkentő hatásának megértéséhez (kézirat benyújtva a PNAS-nek). Kimutattuk továbbá, hogy az NDK-1 befolyásolja a DTC migráció és az apoptotikus testek bekebelezésének folyamatait is a citoszkeleton átrendeződésén keresztül. Ezek az adatok az nm23 sejtmigrációban és apoptózisban betöltött szerepének jobb megértését segítik. | The group I members of the nm23 (nme) gene family encode nucleoside diphosphate kinases (NDPKs). The molecular functions of NDPKs remain ill defined. We studied ndk-1, the sole Caenorhabditis elegans ortholog of group I NDPKs, and focused on its role in Ras/MAP kinase (MAPK)-mediated signaling events during development. ndk-1 inactivation affects vulval cell fate specification through the Ras/MAPK cascade. ndk-1 mutant worms show severe attenuation of activated, diphosphorylated MAPK in somatic tissues, indicative of compromised Ras/MAPK signaling. Using the C. elegans vulval induction system we performed a genetic epistasis analysis, and found that NDK-1 acts downstream of LET-60/Ras but upstream of MPK-1/MAPK, at the level of the kinase suppressors of Ras (KSR-1/2). KSR proteins act as scaffolds facilitating Ras signaling events by tethering signaling components, and we show that NDK-1 binds to KSR-2. Our study provides the first in vivo evidence for a functional NDPK/KSR interaction, revealing that NM23 controls differentiation by modulating the level of activation of Ras/MAPK signaling. These results may help to better understand how dysregulated Nm23 in humans can lead to tumorigenesis (manuscript submitted to PNAS). We also found that NDK-1 influences the processes of DTC migration and apoptotic engulfment through rearrangement of the cytoskeleton. These data contribute to understand the role of NDPK/Nm23 in cell migration and apoptosis.

Actions (login required)

Edit Item