Membrán mikrodomének szerepe az angiotenzinreceptor működésében = The role of membrane microdomains in angiotensin receptor function

Hunyady, László and Gáborik, Zsuzsanna and Szaszák, Márta and Szidonya, László (2008) Membrán mikrodomének szerepe az angiotenzinreceptor működésében = The role of membrane microdomains in angiotensin receptor function. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 46445_ZJ1.pdf Download (65kB)

Abstract

Kísérleteink során biolumineszcencia rezonancia energiaenergiatranszfer (BRET) módszereket állítottunk be az AT1-es angiotenzinreceptor jelátviteli folyamata során a membrán mikrodoménekben létrejövő fehérje-fehérje kölcsönhatások nyomon követésére. Konfokális mikroszkóppal és BRET módszerrel végzett vizsgálatokkal igazoltuk, hogy az AT1-receptorral ellentétben az AT2-receptor angiotenzin II hatására nem kapcsolódik össze ß-arresztin fehérjékkel, mely arra utal, hogy az AT2-receptor tartós aktiválás esetén nem deszenzitizálódik. Kimutattuk továbbá, hogy AT1-receptort és CB1 kannabinoid receptor együtt expresszáló sejtekben angiotenzin II hatására a CB1-receptor is aktiválódik. Adataink arra utalnak, hogy e válasz közvetítésében az angiotenzin II hatására a membránban található lipidekből felszabaduló endokannabinoidok játszanak szerepet. Bizonyítékot szolgáltattunk arra, hogy a dimerizált AT1-receptorok működése során az egyik receptor gátlása a vele molekuláris kapcsolatban lévő másik receptor működését is gátolhatja. Eredményeink alapján arra következtethetünk, hogy az AT1-receptor terápiás célból történő gátlásakor más receptorok működésében is alapvető változások jöhetnek létre. Tekintettel arra, hogy az angiotenzin II AT1-receptorokon keresztül létrehozott hatásainak gátlása fontos terápiás célpont számos keringési betegség gyógyításakor, e mechanizmusok felismerése fontos támpontot jelenthet a terápiás beavatkozások pontos hatásmechanizmusának megértése szempontjából. | We have established methods based on bioluminescence energy transfer (BRET) in order to detect protein-protein interactions, which occur in membrane microdomains during the signal transduction mediated by activation of AT1 angiotensin receptors. We have provided evidence using confocal microscopy and BRET methods that the ß-arrestin binding properties of AT1 and AT2 angiotensin receptors are different. In contrast to AT1 receptors, which interact with ?-arrestin molecules upon angiotensin II stimulation, AT2 receptors do not show this interaction under similar conditions, which suggests that continuous activation of AT2 receptors do not lead to their desensitization. We have also shown that in cells co-expressing AT1 angiotensin and CB1 cannabinoid receptors, angiotensin II can induce CB1 receptor activation. Our data suggest that this response is mediated by angiotensin II-stimulated endocannabinoid release from membrane lipids. We have also demonstrated that in AT1 receptor dimers inhibition of one receptor can inhibit the signaling of the other receptor. In conclusion, our findings suggest that during therapeutic inhibition of AT1 receptors in patients the activity of other receptor systems can also be affected. Considering that AT1 receptors are a major target in the treatment of several cardiovascular diseases, elucidation of these mechanisms is potentially very important for the understanding of the consequences of these therapeutic interventions.

Actions (login required)

Edit Item