Noninvazív magzati Rh-meghatározás real-time PCR-módszerrel = Non invasive detection of fetal Rh using real-time PCR method

Lázár, Levente and Nagy, Bálint and Bán, Zoltán and Nagy, Gyula Richárd and Beke, Artúr and Papp, Zoltán (2007) Noninvazív magzati Rh-meghatározás real-time PCR-módszerrel = Non invasive detection of fetal Rh using real-time PCR method. Orvosi Hetilap, 148 (11). pp. 497-500. ISSN 0030-6002 (print); 1788-6120 (online)

Text oh.2007.27904.pdf Restricted to Repository staff only until 31 March 2027. Download (123kB)

Abstract

Bevezetés: Az anyai vérben keringő szabad magzati DNS kimutatása a noninvazív praenatalis diagnosztika egyik sarokkövévé vált az elmúlt két évtized során. Az anya perifériás keringésében fellelhető szabad magzati DNS felhasználása a praenatalis diagnosztikában az anyai és magzati eredetű DNS különbségén alapszik. Az egyik ilyen különbség az anya és a magzat közötti vércsoporteltérés genetikai háttere. A vércsoport-összeférhetetlenségek közül az Rh-konstelláció a leggyakoribb a klinikai gyakorlatban. Célkitűzés: A szerzők által végzett vizsgálat célja, a szakirodalomban fellelhető eredmények tükrében, a magzati Rh-státus anyai vérből történő meghatározása volt. Módszer: A terhesség 11. és 22. hete között 30 Rh-negatív vércsoportú terhes vérplazmájából, valamint a vérvételt követő amniocentézis során nyert magzatvízből izolált DNS-mintából real-time PCR-módszer segítségével, az 1 kromoszómán (1p36.11) található RhD 7 exon kimutatásával meghatározták a magzat Rh-státusát. Eredmények: A real-time PCR-vizsgálat 24 esetben azonos eredményt adott a RhD 7-es exonjára vonatkozóan a magzatvíz-mintákból, illetve az anyai vérplazmából izolált DNS esetében. Hat esetben a magzatvízből izolált DNS pozitív, a plazmából izolált szabad DNS vizsgálata negatív eredményt adott. A magzatvízből történő RhD-meghatározás során öt esetben nem, huszonöt esetben kimutatható volt az RhD-gén 7 exonja. Következtetések: A real-time PCR egy viszonylag egyszerű és megbízható módszernek bizonyult az anyai vérplazmából történő magzati vércsoport Rh-meghatározására. A módszer érzékenységére vonatkozó eredmények a szakirodalommal összhangban biztatóak, a módszer érzékenysége több marker felhasználásával növelhető. További, nagyobb esetszámú vizsgálat elvégzése a módszer rutin klinikai gyakorlatban történő alkalmazását is lehetővé teszi. Introduction: In the last ten years the detection of fetal origin cells and cell free fetal DNA in maternal circulation opened new horizonts in non ivasive prenatal diagnosis. The diagnostic possibilities are based on the differences between the maternal and fetal origin DNA. One of the differences could be the Rh blood group and the genetical background. The Rh incompatibility is the most frequent blood group incompatibilities in the clinical practice, which can cause fetal anemia, hydrops and even fetal death. Aims: The aim of this study was to detect the fetal DNA in maternal circulation, to determine the Rh status of the fetus, and to compare the reliability of the method with the data found in other studies. Methods: Blood samples and amnionic fluid samples were collected from 30 pregnant women, with Rh negative status, between 11–22 week of gestation presented for genetic amniocentesis at the 1st. Department of Obstetrics and Gynecology, Semmelweis University. After DNA isolation real-time PCR was performed in order to detect the exon 7 of the RhD gene located on the first chromosome (1p36.11.). Results: In 24 cases the PCR reaction gave same result in case of the DNA isolated from plasma and amniotic fluid, but in six cases there was no PCR product of plasma samples and the product was detectable in amniotic fluid samples. The exon 7 was detectable in 25 cases, and there was no product in 5 cases. Conclusions: The real-time PCR method seems to be an easy and reliable method to determine the fetal Rh blood group. The sensitivity and specificity of the method in this study is in concordance with international data. The use of more than one probe could increase the sensitivity of the method.

Actions (login required)

Edit Item