Szfingozin-1-foszfát: Intracelluláris célfehérjék és plazma-membrán transzport azonosítása = Sphingosine-1-phosphate: Identification its intracellular targets and plasma membrane transport

Liliom, Károly and Kovács, Erika and Nagy, Erika (2010) Szfingozin-1-foszfát: Intracelluláris célfehérjék és plazma-membrán transzport azonosítása = Sphingosine-1-phosphate: Identification its intracellular targets and plasma membrane transport. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 61501_ZJ1.pdf Download (2MB) | Preview

Abstract

A jelátvitelben jelentős szerepet játszó lizofoszfolipidek, a szfingozin-1-foszfát (S1P), a szfingozin (Sph), a szfingozilfoszforilkolin (SPC) és a lizofoszfatidsav (LPA) sejten belüli célfehérjéinek azonosítása során kimutattuk, hogy a sejtek fő kalcium-érzékelő fehérjéje, a kalmodulin (CaM) szelektíven köti az aggregált SPC-t, melynek hatására a CaM funkciója gátlódik, mind apoCaM, mind Ca2+CaM esetén (Biochem J 2008). A CaM-SPC kölcsönhatás mechanizmusát és a komplex kristályszerkezetét meghatároztuk (J Biol Chem 2010, FASEB J 2010). Kimutattuk, hogy a Sph hasonló kölcsönhatásra lép a CaM-nal, és vizsgáltuk a CaM-SPC kötődés hatását a rianodin-receptor (RyR1)-általi intracelluláris kalcium mobilizációra. Kimutattuk, hogy a beta-2-mikroglobulin (b2M), amely vesedialízises betegekben amiloid lerakódásokat képez, szelektíven kölcsönhat az aggregált LPA-val, melynek hatására az egyébként stabil fehérje amiloidogén konformációt vesz fel (Biochemistry 2009). A CaM-SPC és a b2M-LPA kölcsönhatások a lipid-fehérje kötődés újfajta modelljeinek tekinthetők. Kimutattuk, hogy sejttípustól függően mind az ABCA1, mind az ABCC1 transzporterek képesek átjuttatni az S1P-t a plazmamembránon, legalábbis részlegesen, de ezeket az eredményeket kísérleteink befejezése előtt a nemzetközi szakirodalomban más kutatócsoportok közölték. A pályázati időszak végén ezért elkezdtük a Sph, S1P, SPC és LPA szállítófehérjéinek azonosítását egyes lipoproteinek szelektív kötési képességeinek vizsgálatával. | This work aimed at identifying the intracellular target proteins of important lysophospholipid mediators (sphingosine-1-phosphate, S1P, sphingosine, Sph, sphingosylphosphorylcholine, SPC, and lysophosphatidic acid, LPA) in signal transduction. We showed that calmodulin (CaM), the ubiquitous calcium sensor of cells, binds selectively to the aggregated SPC, resulting in the inhibition of CaM function in its apo as well as Ca2+-saturated forms (Biochem J 2008). We determined the crystal structure and the mechanism of formation of the complex (J Biol Chem 2010, FASEB J 2010). We showed that Sph similarly binds CaM and studied the role of CaM-SPC interaction in the intracellular Ca2+-mobilization through ryanodine receptor RyR1. We also identified the mechanism of interaction of beta-2-microglobulin (b2M) with aggregated LPA, inducing the amyloidogen conformation of the otherwise very stabile protein, leading to amyloid fibril deposits in patients on long-term dialysis (Biochemistry 2009). The CaM-SPC and b2M-LPA interactions represent a novel lipid-protein binding model. We showed that ABCA1 and ABCC1 proteins, depending on the cell-type, are able to partially transport S1P through plasma membrane. Unfortunately, these results had been published by other groups before we could finish our experiments. We have lately started the identification of carrier proteins of Sph, S1P, SPC, and LPA by investigating their selective binding to different lipoproteins.

Actions (login required)

Edit Item