ABC transzporterek rövid és hosszútávú regulációja metabolikus stresszek hatására = Short and long term regulation of ABC transporters by metabolic sresses

Arányi, Tamás (2012) ABC transzporterek rövid és hosszútávú regulációja metabolikus stresszek hatására = Short and long term regulation of ABC transporters by metabolic sresses. Project Report. OTKA.

Preview

PDF 79183_ZJ1.pdf Download (89kB) | Preview

Abstract

Legfontosabb eredményeinket az ABCC6 gén vizsgálata során értük el. A gén mutációi a pseudoxanthoma elasticum recesszív öröklődésű betegség kialakulásához vezetnek. Megerősítettük, hogy a mutáció hordozói 10x nagyobb kockázatnak vannak kitéve a coronaria arteriabetegség kialakulása tekintetében, mint a kontroll populáció. Az ERK kaszkád aktiválódásának hatására májsejtekben megfigyelt ABCC6 expresszió-csökkenést vizsgálva azonosítottunk egy HNF4 kötőhelyet; igazoltuk, hogy az ERK1/2 aktiválása gátolja a HNF4 okozta ABCC6 expressziófokozódást; beláttuk, hogy a HNF4 szükséges a további aktivátor faktorok hatásához és meghatározza az ABCC6 szövetspecifikus expresszióját. Igazoltuk, hogy az ABCC6 gén első intronjában van egy sej- és főemlős-specifikus aktivátor szakasz, ami legalább két aktivátor fehérje kötőhelyet hordoz. Ezek egyike a C/EBP beta. Kimutattuk, hogy transzkripciós aktiváló hatásának kifejtéséhez szükség van a proximális promóterrel való együttműködésére, ami nem (közvetlenül) a HNF4 transzkripciós faktorral jön létre. Eredményeink azt sugallják, hogy az ABCC6 szerepet játszhat a hepatocyták metabolikus állapotának szabályozásában. Terveztük az ABCC6 gén epigenetikai profiljának leírását is. Beállítottunk tehát egy LC/MS-MS módszert egyedi szekvenciák és teljes genom metiláció vizsgálatára. Igazoltuk, hogy a DNS metiláció egy dinamikus egyensúly eredménye, mely a sejtek osztódásától független folyamatos demetiláció és remetiláció eredménye. | Our most important results were obtained on the ABCC6 gene. Mutations of ABCC6 lead to pseudoxanthoma elasticum, a recessive Mendelian disease. In our studies, we confirmed that mutation carriers have a 10x increased risk to develop coronary artery disease relative to controls. While studying the regulation of the gene, we observed the decrease of the expression in hepatocytes upon the activation of ERK cascade. We showed that ERK activation inhibits ABCC6 expression via HNF4, which plays a crucial role in orchestrating the transcriptional regulation of the gene and regulation of its tissue-specific expression. We also identified a primate and cell-type specific activator sequence in the 1st intron of ABCC6, which harbors at least two binding sites for activator proteins, one of which is C/EBP beta. We have shown that this activator region interacts with the proximal promoter but not directly with HNF4. Our data on the transcriptional regulation of ABCC6 suggest that ABCC6 reflect the metabolic state of hepatocytes and might play a role in influencing it. We plan to investigate the epigenetic profile of the ABCC6 gene. We set up therefore a HPLC/MS-MS method to investigate the methylation of target sequences and genomes. We showed that in contrast to previous hypotheses global methylation level is a result of a dynamic equilibrium independent of replication but depending on permanent demethylation and remethylation.

Actions (login required)

Edit Item